Цель

Целью этого исследования было исследовать экспрессию и внутриклеточную локализацию леверина, плацента-специфической мембраносвязанной аминопептидазы, в плацентах с преэклампсией и их роль в миграции и инвазии трофобластической клетки.

Ход исследования

Экспрессия леверина была исследована в 6 нормальных и 6 плацентах с преэклампсией с использованием иммунофлюоресценции, электрофореза натрия додецилсульфат-полиакриламидного геля с анализом вестерн-блоттинга и иммуноэлектронной микроскопии. Роль леверина в миграции трофобластов и их инвазии была изучена с использованием системы xCelligence и камеры Бойдена с матригелем в клетках HTR-8/SVneo. Эффект сайленсинга генов леверина на отдельные гены, которые вовлечены в трансформацию клеток и онкогенез, был оценен анализом полимеразной цепной реакции. Тест Стьюдента, U-критерий Манна — Уитни, критерий хи-квадрат или F-тест были использованы, чтобы сравнить группы должным образом.

Результаты

Леверин был экспрессирован в клеточных мембранах ворсинок трофобластов здоровых плацент в 3 триместре; в преэкламптических плацентах он был экспрессирован эктопически в цитоплазме, особенно в микровезикулах. Иммуноэлектронная микроскопия показала утечку леверина в капилляры плода и мощную экспрессию в микровезикулах в преэкламптической плаценте. Миграция и инвазия клеток HTR-8/SVneo была снижена на 11,5% (статистическая значимость 0,023) и 56,7% (статистическая значимость 0,001), соответственно, посредством сайленсинга гена леверина . Анализ путей, затронутых сайленсингом леверина, демонстрировал наличие значительной даун-регуляции интегрина А2 (в 39 раз), интегрина В3 (пятикратное) и матричной металлопротеазы 1 (в 36 раз).

Заключение

Экспрессия протеина леверин изменяется в плацентах с преэклампсией. Ее эктопическая экспрессия в цитоплазме и микровезикулах скорее, чем в мембранах клетки, и утечка в капилляры плода, может иметь свою роль в патофизиологическом состоянии преэклампсии. Ген леверина , по-видимому, вовлечен в миграцию и инвазию трофобластических клеток через взаимодействие с интегринами и матричной металлопротеазой 1.

Ключевые слова

аминопептидаза, леверин, микровезикула, плацента, преэклампсия

Placental expression of aminopeptidase-Q (laeverin) and its role in the pathophysiology of preeclampsia
Mona Nystad, MSccorrespondenceemail, Vasilis Sitras, MD, PhD, Merethe Larsen, MSc, Ganesh Acharya, MD, PhD
American Journal of Obstetrics & Gynecology
December 2014Volume 211, Issue 6, Pages 686.e1–686.e31
Key words:
aminopeptidase, laeverin, microvesicle, placenta, preeclampsia
Колмакова Мария Сергеевна